35º Conbravet - Congresso Brasileiro de Medicina Veterinária

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ResumoID:04.1253-2

AREA: Microbiologia

MOTILIDADE DE ESCHERICHIA COLI ENTEROTOXIGÊNICA MEDIADA POR AUTO-INDUTORES

Régis T. Sturbelle (Universidade Federal de Pelotas); Rita de Cássia dos Santos da Conceição (Universidade Federal de Pelotas); Talita Bandeira Roos (Universidade Federal de Pelotas); Fábio Pereira Leivas Leite (Universidade Federal de Pelotas)

Resumo

Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) é a causa infecciosa mais comum de diarréia em suínos. O agente é comensal do intestino delgado e para causar a doença precisa ser capaz de aderir à mucosa (evitando sua eliminação com o trânsito normal do intestino) e de produzir toxinas. O flagelo faz parte do mecanismo sensorial da bactéria que permite ao microrganismo responder a estímulos quimiotáticos ou simplesmente evitar um ambiente desfavorável. A flagelina é a principal proteína constituinte do flagelo. Recentemente, foi demonstrado que o flagelo possui um papel importante na estimulação de células, na expressão e secreção de citocinas pró-inflamatórias através da interação com receptores Toll-like 5 (TLR5). Quorum Sensing é um sistema de sinalização entre as bactérias, os quais produzem substâncias denominadas de auto-indutores (AI). Quando os auto-indutores alcançam uma determinada concentração ocorre uma ativação de fatores transcricionais que acabam regulando a expressão gênica. As catecolaminas (adrenalina e noradrenalina) produzidas pelas células nervosas, que utilizam a via de sinalização do auto-indutor tipo 3 (AI-3) têm um papel significante na expressão gênica bacteriana. Em ETEC, não foram encontrados relatos de expressão gênica envolvidas pelo sistema de Quorum Sensing. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a ação de auto-indutores presentes no meio condicionado e da adrenalina na motilidade de Escherichia coli K88. Meio condicionado foi o meio preparado a partir de um cultivo de Escherichia coli K88 em caldo Minimum Essential Eagle Médium (MEM), centrifugado e filtrado. Um cultivo em BHI a 37oC por 24 horas foi padronizado por espectrofotometria (A600) em DO=1,0. Uma alíquota deste cultivo foi semeada em caldo MEM e incubada em agitador orbital a 37oC por 7 horas, sendo utilizado como inóculo do experimento. Este cultivo foi utilizado no ensaio de motilidade, sendo semeado 1µL nas placas contendo 0,3% de ágar, nos seguintes tratamentos: T1- MEM (controle), T2- MEM + adrenalina 500 µM, T3- MEM + 10% de MEM condicionado, T4- MEM + 50% de MEM condicionado, T5- MEM + 10% de MEM condicionado e 500 µM de adrenalina e T6- MEM + 50% de MEM condicionado e 500 µM de adrenalina. As placas foram incubadas a 37oC e os halos de motilidade foram medidos com 16 horas de cultivo. Nesse estudo observamos que a maior motilidade foi no tratamento que utilizou a adrenalina associada com 50% de meio condicionado, demonstrando que Escherichia coli utiliza moléculas do hospedeiro e moléculas próprias, para potencializar seus fatores de patogenicidade.

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