35º Conbravet - Congresso Brasileiro de Medicina Veterinária

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ResumoID:12.1232-1

AREA: Biotecnologia

EVALUACIÓN DE CANDIDATOS A VACUNA CONTRA ESCHERICHIA COLI O157: H7 EN BOVINOS

Deniel Vilte (Instituto de Patobiología); Mariano Larzábal (Instituto de Biotecnología); Sergio Garbaccio (Instituto de Patobiología); Mariela Gamella (Instituto de Patobiología); Bettina Rabinovitz (Instituto de Patobiología); Ana María Elizondo (Instituto de Patobiología); Fernando Delgado (Instituto de Patobiología); Virginia Meikle (Instituto de Biotecnología); Angel Adrían Cataldi (Instituto de Biotecnología); Elsa C. Mercado (Instituto de Patobiología)

Resumo

El síndrome urémico hemolítico (SUH) es una enfermedad que tiene una alta incidencia en niños menores de 5 años en Argentina, y se estima que la fuente de infección puede ser el consumo de carne bovina mal cocida. Por estas consideraciones, la obtención de vacunas que eviten la colonización del ganado por E. coli O157:H7 sería una de las principales herramientas de un programa de control del SUH. Se describe la evaluación de una formulación vacunal compuesta por γ- intimina C1-280 y EspB con el adyuvante ISA206 (Seppic)-Vitamina D3. Las proteínas empleadas fueron sintetizadas de manera recombinante en E. coli y purificadas. Para ensayar los esquemas de inmunización y de desafío con E. coli O157:H7 se seleccionaron terneros de 6-8 meses no excretores de E. coli O157:H7, y con baja repuesta humoral contra γ- intimina C1-280 y EspB. Se vacunó un grupo de cuatro terneros con 100 μg de cada una de las proteínas recombinantes emulsionadas con el adyuvante por vía intramuscular. Otro grupo de cuatro animales fue inyectado sólo con adyuvante. En todos los casos se aplicaron dos dosis separadas por 21 días. A los 35 días de la primera vacunación los animales fueron desafiados por inoculación nasogástrica con 109 UFC de una cepa de E. coli O157:H7 resistente a ácido nalidíxico (NalR). Se tomaron hisopados recto-anales cada 2 días durante 15 días, detectándose la excreción de E. coli O157:H7 (NalR), mediante recuento en agar SMAC-Telurito-Nal y por enriquecimiento, separación inmunomagnética, aislamiento en SMAC-Telurito-Nal y PCR de zona de confluencia. Con ambos métodos las colonias presuntivas de O157 de confirmaron por aglutinación con látex y PCR. Se midieron semanalmente IgG e IgA séricas e IgA en materia fecal, dirigidas contra intimina y EspB, mediante ELISA. Se observó la inducción de importantes niveles de IgG sérica contra ambas proteínas, los niveles de IgA sérica fueron menores pero significativos. No hubo diferencias significativas en IgA específica en materia fecal. Luego del desafío se observó que el número de animales excretores disminuyó más rápidamente en los animales vacunados que en el grupo placebo. Los resultados indican que γ- intimina C1-280 y EspB recombinantes podrían llegar a ser componentes de una vacuna sistémica con un esquema de vacunación adecuado.

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