35º Conbravet - Congresso Brasileiro de Medicina Veterinária

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ResumoID:05.1023-1

AREA: Parasitologia

COMPARAÇÃO DA EFICIÊNCIA DO GLICEROL E 1,2–PROPANEDIOL COMO CRIOPROTETORES PARA TRYPANOSOMA EVANSI

Daniel Pereira Duarte (UDESC); Kaio César Simiano Tavares (UDESC); Bruna Bristot Colombo (UDESC); Larissa Kaori Oide Komati (UDESC); Luisa Lemos Vieira (UDESC); Luiz Claudio Miletti (UDESC)

Resumo

1. Objetivos: O Trypanosoma evansi é um protozoário digenético da seção salivaria, agente etiológico da doença conhecida como mal das cadeiras ou surra em eqüinos. Há uma grande discussão sobre a representividade das cepas mantidas em laboratório, pois aparentemente há uma adaptação do parasito ao seu hospedeiro, o que pode alterar as características do protozoário. Assim a criopreservação do parasito logo após seu isolamento no campo aparece como uma alternativa viável. Entretanto, os métodos de਍ഀ criopreservação foram desenvolvidos há vários anos e podem implicar em danos ao protozoário dependendo do crioprotetor. O 1,2-propanediol é amplamente utilizado em criopreservação de células, mas não há descrição do seu uso com parasitos. O objetivo deste trabalho foi comparar o comportamento do Trypanosoma evansi em camundongos (Mus musculus) após a inoculação de doses criopreservadas com diferentes crioprotetores,਍ഀ glicerol e 1,2-propanediol. 2. Material e Métodos: 5 mL de sangue contendo 10 9 tripomastigotas/mL foram distribuídos igualmente em 10 criotubos com 10% de crioprotetor, cinco com glicerol e cinco com 1,2-propanediol. As amostras foram submetidas ao vapor de nitrogênio líquido a uma distância de dez centímetros por cinco minutos e após mergulhadas no mesmo a -196ºC. Ao mesmo tempo 2 animais foram inoculados com 10 4 tripomastigotas totais da mesma origem dos congelados, formando o Grupo Controle (GC). Após 60 horas, as amostras congeladas foram reaquecidas a 37ºC por cinco minutos e imediatamente inoculadas em 10 camundongos formando dois grupos, sendo um com cinco animais que receberam os parasitos਍ഀ criopreservados com glicerol (GG) e outros cinco animais que receberam os parasitos criopreservados com 1,2-propanediol (GP). Os animais foram avaliados por 15 dias quanto ao período pré-patente, pico de parasitemia e longevidade através de esfregaços sanguíneos periféricos a cada 12 horas. Realizou-se a análise estatística dos dados por meio da análise de variância (ANOVA), seguida do teste de Tukey para comparação entre as médias. 3. Resultados e Discussão: Não houve variação estatística entre os grupos GG e GP nos parâmetros propostos (Tabela 1) portanto, não há diferenças entre a utilização de glicerol e 1,2-propanediol na criopreservação de Trypanosoma evansi. Entretanto observou-se que devido a menor viscosidade, o 1,2-propanediol é de mais fácil manipulação, permitindo uma maior eficiência na realização das re-infecções utilizando amostras congeladas. Outros crioprotetores não utilizados normalmente para a criopreservação de parasitos estão sendo avaliados. 4. Conclusão: Não há diferença significativa no uso dos crioprotetores utilizados, mas observou-se que a fluidez do 1,2-propanediol o torna de mais਍ഀ simples manuseio.

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