35º Conbravet - Congresso Brasileiro de Medicina Veterinária

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ResumoID:12.839-1

AREA: Biotecnologia

DETERMINAÇÃO DA TAXA DE RECUPERAÇÃO E VIABILIDADE DE CÉLULAS MDBK APÓS CONGELAMENTO COM DIMETILSULFÓXIDO (DMSO) OU GLICEROL.

Hiran Castagnino Kunert Filho (Universidade de Passo Fundo - UPF); Diogenes Dezen (EQUIPE DE VIROLOGIA DESIDERIO FINAMOR); Carine Holz (EQUIPE DE VIROLOGIA DESIDERIO FINAMOR); Thais Fumaco Teixeira (EQUIPE DE VIROLOGIA DESIDERIO FINAMOR); Samuel Paulo Cibulski (EQUIPE DE VIROLOGIA DESIDERIO FINAMOR); Paulo Michel Roehe (EQUIPE DE VIROLOGIA DESIDERIO FINAMOR / LABORATORIO DE VIROLOGIA DM-ICBS/UFRGS)

Resumo

Resumo: O processo de criopreservação é essencial para a manutenção de cultivos celulares, uma vez que a linhagem celular é congelada, a mesma pode ser mantida em nitrogênio líquido por tempo indeterminado. Buscando melhorar a eficiência no processo de congelamento de linhagens celulares, várias substâncias têm sido avaliadas como crioprotetoras. Neste trabalho, foram comparados dois crioprotetores, dimetilsulfóxido (DMSO) e glicerol tamponado (pH 7.0), nas concentrações de 5%, 7,5%, 10% e 12,5%. Para os ensaios da taxa de recuperação de células viáveis e de porcentagem de viabilidade após o congelamento foram utilizadas células da linhagem “Madin Darbin bovine kidney” (MDBK). A taxa de recuperação das células viáveis foi estimada por contagem das mesmas através de coloração com azul de Trypan em camara de Neubauer. A porcentagem de células viáveis foi avaliada 24 horas após o descongelamento, através do ensaio de redução do MTT (3-(4,5 dimethylthiazol-2yl)-2,5 diphenyltetrazolium bromide). Verificou-se que apesar das taxas de recuperação de células viáveis terem sido similares entre os grupos tratados, a porcentagem de viabilidade celular foi significativamente maior para células congeladas com 10% DMSO. Testes com outras linhagens celulares devem ser feitos pois o seu genótipo tem influencia quanto a tolerância e tipo de crioprotetor utilizado bem como em sua concentração.

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