35º Conbravet - Congresso Brasileiro de Medicina Veterinária

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ResumoID:12.753-3

AREA: Biotecnologia

APLICAÇÃO DA GLICOPROTEÍNA D DE HERPESVÍRUS BOVINO TIPO 5 EXPRESSA EM PICHIA PASTORIS COMO ANTÍGENO PARA O DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO POR ELISA INDIRETO

Luana Alves Dummer (UFPel); Talita Bandeira Roos (UFPel); Carina Martins de Moraes (UFPel); Andréa da Silva Ramos Rocha (UFPel); Leandro Quintana Nizoli (UFPel); Fabrício Rochedo Conceição (UFPel); Telmo Vidor (UFPel); Fábio Pereira Leivas Leite (UFPel)

Resumo

O Brasil destaca-se por ser o maior exportador mundial de carne bovina, possuindo o maior rebanho comercial do mundo. No entanto, doenças, como a meningoencefalite causada por Herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5), contribuem para grandes perdas econômicas dos produtores brasileiros. Descrito em quase todo o território nacional e na Argentina, este vírus possui homologia com o Herpesvírus Bovino tipo 1, o agente da Rinotraqueíte Infecciosa bovina e ambos compartilham semelhanças morfológicas e antigênicas. O diagnóstico laboratorial de ambos os vírus é geralmente realizados por provas sorológicas, como a técnica de soro neutralização e ELISA, no entanto, a soro neutralização é uma técnica que demanda tempo e requer profissionais qualificados para a manipulação de agentes virais e cultivos celulares. Por esses motivos, o emprego de ELISA faz-se viável na triagem de rebanhos suspeitos de infecções por BoHV. Glicoproteínas presentes nos envelopes virais do BoHV-1 e 5 tem sido avaliadas quanto a sua capacidade de estimular anticorpos, atuando como vacinas, e também, quanto a sua capacidade de atuar em testes sorológicos. A gD é uma proteína que atende a está possibilidade, uma vez que é capaz de estimular anticorpos neutralizantes e atuar como um dos alvos primários das reações imunológicas do hospedeiro. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a aplicação da forma truncada glicoproteína D de BoHV-5 expressa em Pichia pastoris em um ELISA indireto, visando o diagnóstico de animais positivos e negativos para o BoHV-5. Os resultados demonstraram diferenças significativas nas leituras da média das triplicatas utilizando pool de soros positivos comparados com as médias de soros negativos. Essa diferença chegou a 6 vezes quando os soros apresentavam-se diluídos 1:400 e a concentração protéica para a sensibilização da placa foi de 400ng. Na avaliação individual dos soros de bovinos também houve diferenças significativas entre positivos e negativos. No entanto, a diferenciação entre animais positivos para BoHV-1 e para BoHV-5 não foi possível, o que pode ser explicado pela homologia entre as gD destes vírus. Desta forma, o trabalho demonstra a possibilidade de aplicar a tgD em testes de ELISA indireto para triagem de rebanhos infectados com BoHV-1 e BoHV-5. Entretanto, os testes deverão ser realizados com um maior número de amostras visando à validação da técnica.

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