35º Conbravet - Congresso Brasileiro de Medicina Veterinária

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ResumoID:12.686-1

AREA: Biotecnologia

FERRAMENTA MOLECULAR PARA IDENTIFICAÇÃO DE MYCOBACTERIUM BOVIS ISOLADO A PARTIR DE TECIDO DE BOVINOS

Leone Vinicius Furlanetto (Universidade de Cuiabá); Ricardo César Tavares Carvalho (Universidade de Cuiabá); Eduardo Eustáquio de Souza Figueiredo (Universidade de Cuiabá); Flávia Galindo Silvestre (Universidade de Cuiabá); Walter Lilenbaum (Universidade Federal Fluminense); Leila de Souza Fonseca (Universidade Federal do Rio de Janeiro); Joab Trajano Silva (Universidade Federal do Rio de Janeiro); Vânia Margaret Flosi Paschoalin (Universidade Federal do Rio de Janeiro)

Resumo

Mycobacterium bovis é o agente causador de uma importante zoonose, a tuberculose bovina, como sua identificação por microbiologia convencional é trabalhosa e demorada, objetivamos identificar por métodos moleculares os bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR) isolados a partir de tecido de bovinos coletados durante necrópsia. Um rebanho bovino leiteiro de 50 animais da cidade de Macaé (RJ) com histórico clínico de TB foi testado por tuberculinização intradérmica, dos quais 34 animais foram considerados reativos e então abatidos. Durante a necropsia, 91 amostras de apresentando lesões foram coletadas. As amostras foram descontaminadas por Petroff, inoculadas em meio Lowenstein-Jensen com piruvato de sódio e incubadas por 90 dias a 37ºC. Após crescimento, os bacilos álcool ácido resistente (BAAR) foram submetidos a m-PCR. Dois pares de oligonucleotídeos foram usados para amplificação simultânea de duas regiões internas das seqüências IS6110 (245 pb) e RvD1Rv2031c (500 pb). Das 91 amostras coletadas e processadas juntas por animal, 17 colônias foram isoladas e as duas regiões alvo foram amplificadas em 15 (88,24%). As duas amostras negativas (11,76%) foram confirmadas como micobactérias não-tuberculosas por PCR-RFLP. Concluímos que a m-PCR desenvolvida no presente estudo demonstrou-se uma técnica rápida e reprodutível, podendo ser uma valiosa ferramenta para a identificação dos BAAR isolados de lesões sugestivas de TB.

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