35º Conbravet - Congresso Brasileiro de Medicina Veterinária

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ResumoID:01.559-2

AREA: Bovinos e Bubalinos: Produção, Reprodução, Clínica e Cirurgia

EFEITO D0 PROCESSO DE SEXAGEM DE SÊMEN POR CITOMETRIA DE FLUXO SOBRE A MORFOMETRIA DA CABEÇA DE ESPERMATOZÓIDES BOVINOS

Katiana Mello Oliveira (Universidade Federal de Uberlândia); Guilherme Sicca Lopes Sampaio (Universidade Federal de Uberlândia); Daniel Alves Pinto (Universidade Federal de Uberlândia); Elmo Gomes Diniz (Universidade Federal de Uberlândia); Marcelo Emílio Beletti (Universidade Federal de Uberlândia)

Resumo

Durante a produção do sêmen sexado criopreservado, as células espermáticas são submetidas a processos físicos e químicos: diluição, incubação, coloração, passagem pelo citômetro de fluxo, exposição a laser, pressão, centrifugação e criopreservação. Este estudo objetivou analisar alterações morfométricas da cabeça de espermatozóides causadas pelo processo de sexagem por citômetro de fluxo. Para tal utilizou-se sêmen de 15 touros mantidos em central de tecnologia de sêmen dos quais foram obtidos esfregaços de sêmen antes e após sexagem. O primeiro foi confeccionado logo após a aprovação do ejaculado para o processo de sexagem, e o segundo logo após o descongelamento do mesmo ejaculado já sexado. Os esfregaços foram fixados em solução de etanol e ácido acético (3:1) por 1 minuto, seguido de um banho de etanol 70% por 3 minutos. Depois foram hidrolisados em ácido clorídrico 4N por 25 minutos, lavados e secos á temperatura ambiente. Em seguida, foram corados com uma gota de azul de toluidina a 0,025% pH 4 e cobertos com lamínula. Foram obtidas 100 imagens digitais de cada lâmina a partir de microscopia de luz em objetiva de 100x, das quais foram segmentadas 100 cabeças de cada lâmina. Através dos programas desenvolvidos em ambiente Scilab determinou-se a largura (L), comprimento (C), razão largura/comprimento (L/C), área (A), elipsidade (E), perímetro (P), fator de forma (FF), simetria lateral (SL) e simetria antero-posterior (SAP) de todas as cabeças segmentadas. Descritores Fourier com amplitude de 0 a 2 (F0, F1, F2) foram também considerados para caracterização e análise da forma. Os dados foram analisados pelo Teste t de Student (p≤ 0,05). A largura, comprimento, razão largura/comprimento, área, elipsidade, perímetro, simetria ântero - posterior e descritores Fourier F0 e F2 não mostraram diferenças estatisticamente significativas entre sêmen in natura e sêmen sexado, enquanto simetria lateral foi estatisticamente maior para sexado e fator de forma e descritor Fourier F1 foram maiores para sêmen in natura. Os resultados sugerem que o sêmen sexado não apresenta alterações significativas na forma da cabeça após o processo de sexagem por citometria de fluxo. Existe a possibilidade de que mesmo que alguns espermatozóides sofram alterações morfométricas provocados pela manipulação, estes não apresentarão condições para serem sexados por não se alinharem adequadamente na passagem do citômetro, sendo assim descartados pelo mesmo. Mesmo espermatozóides assimétricos que já existissem no ejaculado antes da sexagem seriam também descartados. Isso justificaria a maior simetria lateral encontrada no sêmen após o processamento.

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